Tomoyo Ochiishi,高级研究员,高级研究员,生物医学研究所,国立先进工业技术研究所,Akira Kitamura,北海道大学高级生命科学研究科,Hideki Shimura,副教授,神经病学系副教授,北海道大学大学医学院等。我们开发了一种技术,可以可视化作为致病因素之一的淀粉样蛋白 β (Aβ) 在活体神经细胞和体内的动态变化。

 Aβ 容易聚合并形成大的聚集体。绿色荧光蛋白(GFP)常用于观察蛋白质在活细胞和个体中的定位,但Aβ和GFP融合的蛋白质(Aβ-GFP)是通过聚合Aβ获得的蛋白质。据说荧光是抑制。因此,即使在体内表达,在 Aβ 聚合时也没有观察到荧光,并且很难可视化 Aβ 的定位和动态。

 迄今为止,当使用12个或更少的氨基酸作为连接Aβ和GFP的氨基酸序列(接头)时,Aβ聚合时GFP的荧光消失。这一次,我们开发了一种融合蛋白,它使用 14 个氨基酸作为接头,无论 Aβ 的聚合状态如何,都可以观察到荧光。发现该Aβ-GFP不会因GFP的融合而超过一定水平,而是以二聚体为中心的寡聚体形式存在于生物体内外。这使得分析 Aβ 在活细胞中的动态运动和原代培养神经元中的积累状态成为可能。此外,由于它会形成高毒性的 Aβ 寡聚体,参与阿尔茨海默病的发病,因此可以分析 Aβ 寡聚体的聚合度与其对细胞的毒性之间的关系。

 未来,预计将有助于利用培养细胞和活体筛选阿尔茨海默病治疗药物的候选物质,并阐明阿尔茨海默病的发病机制。

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