横滨市立大学的一个小组在世界上首次成功地仅对一个红细胞进行了“单细胞原生质谱分析”。这是由国际科学与技术学院理学院四年级生坂本和香先生(现为博士一年级生)领导的毕业研究。

 为了按原样分析蛋白质,使用“天然质谱法”通过电离蛋白质来测量蛋白质的质量,同时尽可能保持对功能重要的结构未变性。在一般质谱中,加入酸或有机溶剂来调整容易电离的条件以提高灵敏度,但在原生质谱中,即使灵敏度有所牺牲,样品也制备为中性水溶液。通常,通过研磨大量细胞收集的蛋白质被纯化并用于实验,但如果可以“逐个细胞”分析功能性蛋白质的质量,则可以将各种状态的细胞一一比较。因此。 ,在本研究中,我们尝试仅使用一个红细胞来获取数据,因为它用于原生质谱分析。

 课题组参考前期研究开发的实验方法,对分子量为数百的小分子化合物进行综合分析,在显微镜下对红细胞、待添加试剂进行测定的采样方法、条件等继续推敲。结果,通过优化各种条件,我们成功地采样了 30、10 和最后 1 个具有良好重现性和原始血红蛋白的红细胞,并通过原生质谱法对其进行了检测。实验过程是将一个红细胞快速吸入超细玻璃管中,加入少量促进电离而不使蛋白质变性的醋酸铵水溶液,然后用天然质谱法观察血红蛋白离子。成功的重要决定因素是把握要点并明智地进行。

 “原生”的质谱,即自然状态下的“一个细胞”,可以更准确地掌握和比较每个活细胞中蛋白质的状态,为生命科学研究的发展提供可能。做出巨大贡献。

纸张信息:[分析化学] 人红细胞单细胞天然质谱

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